24孔板里293細(xì)胞轉(zhuǎn)染后面的孔里細(xì)胞死亡原因

問(wèn)：我在24孔板里做293細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染試劑是invitrogen的Lipofectamine2000。奇怪的是，每次加完DNA- Lipofectamine complex，24個(gè)孔當(dāng)中的后面幾個(gè)孔(比如*后6個(gè)孔)里的細(xì)胞就明顯有一部分死亡，死亡率是10-30%，通常*嚴(yán)重的是*后兩個(gè)孔。但是前面的孔里的細(xì)胞總是沒(méi)有問(wèn)題。用不同的DNA做實(shí)驗(yàn)，都發(fā)生同樣的問(wèn)題，就是總是后面的孔里細(xì)胞死亡，而前面的孔里細(xì)胞沒(méi)問(wèn)題。是怎么回事呢?

答：如果你在加DNA-Lipofectamine complex時(shí)孔板里是沒(méi)有液體的，會(huì)在風(fēng)機(jī)下風(fēng)干的，很快的，這樣你在加到后面的孔時(shí)，部分細(xì)胞已經(jīng)干了，所以你先加的很好，后面的就有問(wèn)題。解決辦 法就是，你不要一起吸凈所有孔的液體，6個(gè)孔為一個(gè)單位，吸棄孔里的液體，在加DNA-Lipofectamine complex，就可以了。